ماجرای فیلم ادامه قسمت اول (Night at the Museum 2006) است که حول و هوش اتفاقاتی است که در موزه اسمیتسونیان واشنگتن رخ میدهد .(بن استیلر) که بعد ازاتفاقات داستان اول از شهر خارج شده بعد از گذشت چند وقت به شهر بر میگرده و متوجه میشه که موزه قبلی تعطیل شده و تمام اشیاء عتیقه این موزه به موزه جدیدی در واشنگتن انتقال پیدا کرده . شخصیتهای جدید این قسمت ماجراهای جالب و خنده داری رو رقم میزنن که هر بیننده ای رو به خودش جلب میکنه …

نیروی تهدیدآمیزی تاریکی به نام "آلفا" به شهر بزرگی حمله ور میشود و جان همه را تهدید می کند، دو مامور ویژه می خواهند با این تهدید مرموز مقابله کنند و به همین صورت یک مسابقه ترتیب می دهند تا ...